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产品名称

BLU-V Viability PMA Kit 试剂盒

产品型号
BLU-V Viability PMA Kit 试剂盒
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产品描述

BLU-V Viability PMA Kit

用于区分活和死亡微生物

  • 清晰区分微生物活与死亡细胞的DNA
  • 在不影响活细胞DNA的前提下,有效结合死亡细胞DNA
  • 直观易用的实验方案

 

QIAGEN PMA Reagent使用DNA嵌入试剂单叠氮丙啶(PMA),通过检测DNA,区分活与死亡细胞。

PMA可选择性进入细胞,由光化激活进而嵌入DNA并与之共价结合,从而后续PCR中强烈抑制后者的扩增反应。因此由死亡细胞DNA生成信号的CT值会发生显著的升高,从而明确区分活与死亡细胞。
 
性能
基于PMA的活菌PCR能够明确区分活和死亡细胞的DNA。PMA选择性进入死亡细胞,由光化激活进而嵌入DNA并与之共价结合,从而在后续PCR中强烈抑制后者的扩增反应。因此由死亡细胞DNA生成信号的CT值会发生显著升高,从而实现了对活与死亡细胞之间的明确区分。
原理
单叠氮丙啶(PMA)是一种光激活的化合物,其在分子生物学应用中被广泛应用于针对微生物生命活/死亡细胞之间的区分工作。

当使用特定波长激光激活PMA时,PMA会嵌入DNA并与之共价结合。在后续的PCR反应中上述结合的DNA不被扩增,导致扩增信号降低。

PMA无法穿透完整的生物膜结构。来自活微生物的DNA由于有完整膜结构的包裹而不会受到PMA修饰,因此可以被PCR反应扩增检测出来。微生物死亡细胞的膜结构失去了其原有的保护功能,PMA能够进入细胞并修饰其中的DNA。微生物细胞中经修饰的DNA在PCR反应受到抑制,从而导致扩增信号降低。
流程
制备细菌样本并使用PMA进行处理。在BLU-V仪器中使用特定波长激光照射激活PMA化合物之后,其不可逆地结合细胞的DNA,后者在PCR反应中将无法实现扩增。因此,能够检出活细胞的DNA。
应用
区分活/细胞在一些实际应用中扮演着至关重要的角色,例如,衡量净化操作成功与否的卫生检测、以及区分活/死亡的军团杆菌,从而监测病原杀灭效率的的监管合规性水质检测。
 

 

 

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