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产品名称

QuantiNova Probe PCR Kit 试剂盒

产品型号
QuantiNova Probe PCR Kit
所属分类
没有此类产品
产品描述

QuantiNova Probe PCR Kit 试剂盒

 

用于基于探针技术的real-time PCR,具有高度灵敏、特异性、超快速的特性
 

  • 通过新型热启动机制获得无与伦比的特异性
  • 通过内置颜色指示剂实现准确的反应构建
  • 灵敏的检测低至单拷贝的靶序列
  • 采用超快速PCR技术,提高样本通量和反应速度
  • 与QuantiTect Primer Assay实现无缝对接
 
 
QuantiNova SYBR Green PCR Kit具有更高特异性、敏感度、反应速度和处理安全性,为SYBR Green-based qPCR技术树立了全新标准。创新的热启动技术显著增加了real-time PCR特异性,通过使用优化的试剂,能够在任何real-time PCR仪上从cDNA或gDNA——甚至是数量低至1个拷贝的靶标——获得精确的定量检测结果。此外,内置的颜色指示剂帮助确保加样的准性。
 
性能
带有惰性染料,便于观察移液
QuantiNova Probe PCR Kit中的预混液含有蓝色惰性染料,不会干扰real-time PCR,但是使反应液在管中或孔板中便于观察。QuantiNova Yellow Template Dilution Buffer含有黄颜色惰性染料。当稀释在QuantiNova Yellow Template Dilution Buffer中的模板核酸被加入预混液时,溶液颜色由蓝色变为绿色,便于观察移液和反应体系构建是否正确。
 
反应液可稳定储存达100小时
real-time PCR混合液可在30°C储存长达100小时,不会影响后续反应表现(表1)。凭借其出色的稳定性,即使长时间在室温储存,也无需加入冷却剂,QuantiNova Probe PCR Kit是高通量反应的理想选择(参见下表)。
 

表1. 对反应液放置于30°C 100小时之前和之后的CT值对比。Real-time PCR反应液包括预混液、cDNA模板、引物和探针,在30°C孵育100小时后,之后与刚制备的反应液同时进行real-time PCR反应。对三种不同模板量进行三次重复实验。对比试剂盒来自供应商L的基于探针技术的PCR试剂盒,QuantiNova Probe PCR Kit的CT值在反应液于30°C放置较长时间后没有变化。

表1. 反应液的储存时间对反应稳定性的影响
 
平均CT
  QuantiNova Probe PCR Kit 来自供应商L的Probe PCR kit
模板量,单位ng 0 h 100 h 0 h 100 h
10 25.09 25.26 24.14 27.08
1 28.51 28.66 27.50 30.51
0.1 31.94 31.78 31.01 34.08
无模板对照 无检测结果 无检测结果 无检测结果 无检测结果
 
 
准确、灵敏的检测单一DNA分子
QuantiNova Probe PCR Kit具有高度灵敏性,能够准确、灵敏的检测即使是一个拷贝。该试剂盒提供的特制预混液能够在单管中检测两种丰度差异极大的靶基因。因此可节约时间、费用、以及所需样本量。此外,获得的双重PCR分析数据与单重PCR分析的数据相当。
 
对困难基因也能有出色表现
QIAGEN成熟的专有缓冲液技术与新型QuantiNova DNA Polymerase、QuantiNova Antibody和QuantiNova Guard配合起来,确保了real-time PCR实验的成功,无需进行费时、费试剂的反应条件优化;即使对挑战性模板也能实现成功扩增。
 
在多种real-time PCR仪上都有稳定表现
QuantiNova Probe PCR Kit可用于多种real-time PCR仪。试剂盒中以单管提供ROX染料,如使用需要ROX作为参比染料的PCR仪,则可加入该染料。该试剂盒在不同PCR仪上使用均可获得出色结果,具有灵敏性、可重复性和高效的特点。尽管不同的PCR仪使用不同的反应实验方案,该试剂盒都能获得稳定的结果。

原理
QuantiNova Probe PCR Kit采用新型的抗体介导的热启动技术,可对cDNA或gDNA进行单重或多重real-time PCR检测,具有高度特异性。在温度较低时,QuantiNova DNA Polymerase在QuantiNova Antibody和新型添加剂QuantiNova Guard的作用下,出于非活性状态。严格的热启动机制能够防止引物的非特异性接合,以及防止生成引物二聚体。将温度升至95°C,两分钟后,QuantiNova Antibody和QuantiNova Guard发生变性,QuantiNova DNA Polymerase被激活,开始PCR扩增反应。

操作流程
QuantiNova Probe PCR Kit含有即用型预混液,因此无需优化反映条件。只需将gDNA或cDNA模板、引物和探针加入预混液,按照试剂盒使用手册中的实验方案进行反应,就可快速获得可靠结果。ROX参比染料在单管中另外提供,染料浓度可依据PCR仪种类进行调节,因此QuantiNova Probe PCR Kits可用于各种real-timePCR仪。由于ROX染料浓度经过优化,因此该试剂盒可通过自动数据分析,检测低拷贝数基因。

应用
QuantiNova Probe PCR Kit可用于基于探针的cDNA基因表达分析和定量gDNA分析,适用于多种real-time PCR仪,包括Applied Biosystems、Bio-Rad、Cepheid、Eppendorf、Roche和Agilent的PCR仪。

 

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